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润滑油急性生物毒性评定技术及毒性分级标准
发布日期:2017/6/19 16:43:25 作者:luke    点击:615

  随着润滑油的广泛使用,其生物毒性对环境的影响越明显。矿物润滑油对地下水的污染影响可达100年,撤量矿物油会阻碍植物的生长和毒害水生生物,约0.1Jig/g的矿物油即可使水生壳类生物减寿20%m.因此,有必要研究润滑油的生物毒性。

我国在1995年颁布了《水质急性毒性的测定――发光细菌法》,但其适用范围只限于在水中可溶性化学物质的水质急性毒性监测。对于较难溶于水的试验物质,也有学者采用增溶剂或超声波技术等方法增溶;但这些方法可能会改变试验物质的自然性质,并导致非代表性的生态毒性关系。美国ASTM于1998年公布了“润滑油毒性测试:样品液制备方法的标准”。国内外一些学者有采用此标准制备样品液,用珊湖虫、章鱼仔、海蜗牛、水螅等海生生物研究原油和石油产品的生物毒性。这些海洋生物对石油类物质的生物毒性耐受性较强,试验时间相对较长,成本较篼。

本文参照国内、外的相关标准,建立了一套利用发光细菌检测润滑油急性毒性的试验方法,并成功地检测出各种润滑油的急性生物毒性大小。

1试验原理、试验设备和试验方法1.1试原理发光细菌急性毒性试验亦称Microtax生物毒性试验,它以明亮发光杆菌(photobacteriumphosphoreum)作指示生物,以其发光强度的变化为指示,测定环境中有害有毒物质的生物毒性。当有毒有害物质与发光细菌接触时,发光强度立即改变,并随着毒物浓度的增加而发光减弱。这种发光强度的变化,可用精密测光仪器定量测定。

1.2试验菌种和试验仪器选用明亮发光杆菌T3小种作为菌种。发光细菌的制备有2种方法:一种是发光细菌新鲜菌悬液的制备,另一种是发光细菌冻干粉复苏法其中冻干粉复苏法是国家标准方法,其优点是可实行质量控制,冻干粉可长期保存方便使用,操作简便,节约时间本文试验采用冻干粉复苏法,菌种由中国科学院南京土壤研究所提供。

测光仪器选用国产DXY-2型生物毒性测试仪(中国科学院南京土壤研究所仪器厂生产),其工作原理如所示1.3试方法由于润滑油在自然条件下很难溶于水,因此本文采用半数效应载荷(medianeffectload,ELW)作为润滑油在水中生物毒性的判定指标,并采用载荷率(loadingrate,加人的试验材料与含水介质之比)来衡童润滑油与水的量化关系。

为了模拟自然条件下润滑油的典型污染情况,本文参照美国ASTM6081-98标准中的样品制备方法准备样品液,使用水融合组分(wateraccommodatedfraction,WAF)方法制备试验样品液。

WAF溶液的制备如和所示。搅拌榉应该以适当的速度运转,以保证液面旋涡的深度为WAF溶液制备容器中试验溶液高度的10% ~35%.搅拌时应注意旋转速度,不要把试验材料向下拉到容器的底部,并且搅拌速度不要过快,以免产生乳化现象。

在制备WAF溶液时,为了使润滑油和水溶液充分融合,需要一定的搅拌时间随着搅拌时间的延长,水中油的含童增加,但增加量逐渐平缓根据Gir-ling的建议,一般需要搅拌20~24h.搅拌后,应沉淀1~2h因为本文选用的试验生物是海生发光细菌,这种发光细菌需要在含盐水溶液中生存,因此,将加有3%NaCl的蒸馏水作为准备WAF中的水溶液和稀释水溶液。

采用发光细菌冻干粉复苏法制备试验用发光细菌液,并测定标准毒物化汞(HgCl)的£(值是否在0.1±0.02mg/L的范围内,以检测制备的发光细菌液是否合格。

表3难溶物质急性生物毒性分级毒性等级ELjo栽荷率/(mg'L-1)毒性级别I>10向装有样品液的比色管中加入微量(1斗)发光细菌液,15min后用生物毒性测试仪检测其发光度。每管样品液均配一对照(CK)管(化钠-蒸馏水溶液,浓度为0.03g/mL),并重复3次。发光细菌法测定润滑油急性生物毒性的具体操作程序可参见
 

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